Оборудование для ПЦР

ПЦР — это метод, который позволяет проверить генетический материал, экстрагированный из исследуемого клинического образца, на наличие в его составе участка чужеродной или измененной генетической информации и используется для получения копий непротяженных участков ДНК, специфичных для каждого конкретного наследственного или инфекционного заболевания, а также исследуемого генетически обусловленного признака, и, кроме того, для визуализации (в случае присутствия) таких специфических участков, что и является целью генодиагностики.

 

Для проведения ПЦР в простейшем случае вам потребуются следующие компоненты:

  • ДНК-матрица, содержащая тот участок ДНК, который требуется амплифицировать;
  • два праймера, комплементарные противоположным концам разных цепей требуемого фрагмента ДНК;
  • термостабильная ДНК-полимераза — фермент, который катализирует реакцию полимеризации ДНК. Полимераза для использования в ПЦР должна сохранять активность при высокой температуре длительное время, поэтому используют ферменты, выделенные из термофилов — Thermus aquaticus (Taq-полимераза), Pyrococcus furiosus (Pfu-полимераза), Pyrococcus woesei (Pwo-полимераза), Thermus thermophilus (Tth-полимераза) и другие;
  • дезоксирибонуклеозидтрифосфаты (dATP, dGTP, dCTP, dTTP);
  • ионы Mg2+, необходимые для работы полимеразы;
  • буферный раствор, обеспечивающий необходимые условия реакции — рН, ионную силу раствора. Содержит соли, бычий сывороточный альбумин.

 

Мы можем предоставить вам все необходимые компоненты и оборудование высочайшего качества для проведения ПЦР анализов, соответствующих всем требованиям.

 

ПЦР проводят в амплификаторе — приборе, обеспечивающем периодическое охлаждение и нагревание пробирок. В ассортименте наших партнеров имеются современные амплификаторы, которые позволяют задавать сложные программы, в том числе с возможностью «горячего старта», Touchdown ПЦР и последующего хранения амплифицированных молекул при 4 °C.

Для ПЦР в реальном времени выпускают приборы, оборудованные флуоресцентным детектором. Существуют также приборы с автоматической крышкой и отделением для микропланшет, что позволяет встраивать их в автоматизированные системы. Например, чтобы избежать испарения реакционной смеси, в пробирку добавляют высококипящее масло, например, вазелиновое. Если используется амплификатор с подогревающейся крышкой, этого делать не требуется.

Обычно при проведении ПЦР выполняется 20—35 циклов, каждый из которых состоит из трёх стадий. Предлагаем полный перечень необходимого оборудования для ПЦР на каждой стадии.

 

Комплектация ПЦР лабораторий:

  1. Обработка материала и выделение нуклеиновых кислот:
    •    бокс биологической безопасности не ниже ІІ класса;
    •    центрифуга клиническая для пробирок объемом 5-100 мл;
    •    центрифуга-вортекс;
    •    микроцентрифуга от 12 до 16 000 g для пробирок объемом 1,5 мл;
    •    твердотельный термостат для пробирок объемом 1,5 мл с диапазоном рабочих температур 25-100 °С;
    •    вакуумный отсасыватель с колбой-ловушкой;
    •    набор автоматических пипеток сменного объема (минимум 3 пипетки: до 20 мкл, до 200 мкл и до 1000 мкл);
    •    одноразовые полипропиленовые микроцентрифужные пробирки с завинчивающимися или плотно закрывающимися крышками, объемом 1,5 мл;
    •    одноразовые наконечники для пипеток сменного объема с аэрозольным барьером до 20, 200 и до 1000 мкл;
    •    одноразовые наконечники без фильтра для пипеток сменного объема до 200 мкл;
    •    штативы для наконечников и микропробирок объемом 1,5 мл;
    •    холодильники для реагентов и биологического материала с камерами, которые поддерживают температуру +6 ±2°С и минус 18 ±2°С (при необходимости — минус 70°С);
    •    емкость с дезинфицирующим раствором;
    •    емкость для отработанных расходных материалов.

 

  1. Для приготовления ПЦР-смеси и проведения амплификации:
    •   ПЦР-бокс с бактерицидной лампой;
    •   амплификатор (термоциклер) – для работы в классическом формате или в реальном времени;
    •   центрифуга-вортекс;
    •   детектор флюоресценции типа «Джин» или «Ала 1/4» (для детекции продуктов амплификации по конечной точке);
    •   твердотельный термостат (при необходимости самостоятельного приготовления реакционных пробирок для «горячего старта» из отдельных компонентов);
    •   набор автоматических пипеток сменного объема (минимум 2 шт);
    •   одноразовые полипропиленовые пробирки для амплификации объемом 0,5 или 0,2 мл (в зависимости от марки амплификатора);
    •   одноразовые наконечники для пипеток сменного объема с аэрозольным барьером до 20 и 100 мкл;
    •   штативы для наконечников и микропробирок на 0,5 или 0,2 мл;
    •   холодильники для хранения реагентов и выделенных НК с камерами, который поддерживает и температуру +6±2°С и минус 18±2°С;
    •   емкость для отработанных расходных материалов.

 

  1. Для электрофоретического анализа продуктов ПЦР:
    •    Камера для горизонтального электрофореза;
    •    Источник постоянного тока с напряжением 150-460 В;
    •    Трансиллюминатор с кабинетом или камерой для просмотра гелей;
    •    Видеосистема с цифровой видеокамерой для регистрации результатов;
    •     Компьютер для анализа результатов электрофореза и передачи их на «чистую зону» лаборатории;
    •    Микроволновая печь для плавления агарозы;
    •    Колба коническая из термостойкого стекла для плавления агарозы объемом 250 мл;
    •    Мерные цилиндры объемом 1 л и 100 мл;
    •    Штатив для микропробирок на 0,5 или 0,2 мл;
    •    Отдельная автоматическая пипетка до 20 мкл;
    •    Одноразовые наконечники для пипеток сменного объема до 20 мкл;
    •    Холодильник с камерой, которая поддерживает температуру +6±2°С;
    •    Емкости для отработанных расходных материалов, дезактивации буфера и гелей с бромистым этидием.

 

Все это вы сможете приобрести у нас от ведущих мировых производителей – наших европейских партнеров.

 

ProSpection обеспечить вас качественным оборудованием для ПЦР и поможет с оснащением вашей лаборатории, выбором и закупом оборудования для проведения научных исследований и клинических диагностических исследований.

 

С помощью нашего оборудования для ПЦР обеспечьте себе достоверные результаты в области генодиагностики наследственных и инфекционных заболеваний.

 

Чтобы подать заявку, позвоните по тел. +420 776644290 или отправьте по электронной почте: a.calyj@prospection.cz